鸡新城疫病毒F基因的克隆表达【动物医药】_转角的夏天—原创毕业论文成稿分享交流与写作参考大全！

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鸡新城疫病毒F基因的克隆表达

摘要：为了进一步开发研究Newcastle disease，为拮抗新城疫提供新思路，更为有效防控新城疫病提供新视野。本试验特对鸡新城疫Ⅳ系毒株F基因进行研究，通过扩增目的基因片段，并构建重组质粒，将重组载体通过大肠杆菌感受态细胞进行高效表达。通过PCR方法在NDV Ⅳ系毒株中扩增出1670pb的基因片段并将其克隆于原核表达载体pMD18-T，进行重组质粒的构建，将连接物转化至E. coli感受态细胞中，通过SDS-PAGE的检测。结果表明，在大肠杆菌中成功表达了鸡新城疫Ⅳ系病毒F蛋白。

关键词：鸡新城疫病毒；连接产物；诱导表达

目    录

摘要........................................................................ 1
Abstract.................................................................... 2
1引言....................................................................... 3
    1.1 Neweastlediseasevirus，NDV概述........................................4
       1.1.1 NDV特性.........................................................4
       1.1.2 NDV的生物活性.................................................. 4
       1.1.3 NDV的基因构架及F蛋白.......................................... 4
       1.1.4研究的目的及意义................................................ 5
2材料与方法................................................................. 5
    2.1材料................................................................. 5
       2.1.1病毒、菌种和质粒.................................................5
       2.1.2酶及主要试剂.................................................... 5
    2.2方法................................................................. 5
       2.2.1引物............................................................ 5
       2.2.2 NDV RNA提取................................................... 6
       2.2.3 PCR扩增与检测...................................................6
       2.2.4 PCR产物的回收与纯化.............................................6
       2.2.5 E. coli感受态细胞制备.......................................... 6
       2.2.6连接产物的转化.................................................. 7
        2.2.7表达转化菌落PCR鉴定........................................... 7
       2.2.8重组质粒双酶切鉴定.............................................. 7
       2.2.9诱导表达........................................................ 7
       2.2.10 SDS-PAGE电泳...................................................8
    2.3结果与分析........................................................... 8
        2.3.1 F基因的RT-PCR扩增结果......................................... 8
        2.3.2菌液PCR结果................................................... 9
        2.3.3克隆质粒的双酶切鉴定.......................................... 10
        2.3.4 NDV F基因蛋白表达产物的 SDS-PAGE 电泳检测结果.................11
3讨论...................................................................... 12
4结论...................................................................... 12
参考文献................................................................... 14
致谢....................................................................... 15

鸡新城疫病毒F基因的克隆表达【动物医药】

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