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| 中华绒螯蟹CYP4C基因的分子进化研究 摘 要 中华绒螯蟹（Eriocheir japonica sinensis）是一类重要的经济蟹类，可同时适应淡水和咸水的生活。然而，关于中华绒螯蟹渗透调节的分子机制一直不是特别清楚。本研究选取渗透调节中的关键基因CYP4C，在中华绒螯蟹和三疣梭子蟹两个物种中进行了对比分析。首先，从NCBI下载十个十足目动物的CYP4C基因的序列，进行系统发生关系的重构。接着，分别将中华绒螯蟹和三疣梭子蟹设置为前景枝，进行选择压力分析。最后，对中华绒螯蟹和三疣梭子蟹中CYP4C基因的表达量进行了检测。研究结果发现，中华绒螯蟹作为前景枝时，检测到了显著的正选择信号（ω2=25.51）。并且，相比于三疣梭子蟹，CYP4C在中华绒螯蟹中有更高的表达量。这些结果，提示中华绒螯蟹中CYP4C基因的功能得到了增强，以便于其更好的适应咸淡水的转换。 关键词：中华绒螯蟹；CYP4C基因；渗透调节；正选择 目 录 前 言 1 1 材料与方法 3 1.1 构建系统进化树 3 1.1.1 系统发生关系重建的目的 3 1.1.2 系统发生关系重建的方法 3 1.1.3 系统进化树的构建 3 1.2 压力分析 4 1.3 引物设计 4 1.4 qRT-PCR实验 5 1.4.1 实验的动物组织 5 1.4.2 实验试剂 6 1.4.3 实验仪器 6 1.4.4 提取RNA 6 1.4.5 合成cDNA并扩增 7 1.4.6 实时荧光定量PCR 8 2 结果 9 2.1 系统进化树 9 2.2 选择压力分析结果 12 2.3 实时荧光定量PCR结果 13 3 讨论 14 4 结论 15 参考文献 16 致 谢 18 |
