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| CRISPR介导的MPK11基因敲除及其功能研究 摘 要 CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) /Cas (CRISPR-Associated)是最近几年来快速发展的一种基因编辑技术，是一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。通过设计可以与目的基因配对的单链gRNA(guide RNA)，使其引导Cas核酸酶蛋白在配对位点处进行切割，导致双链DNA断裂，从而利用生物体内的非同源末端修复机制（NHEJ）或同源重组机制（HR）修复DNA，导致目的的基因的替换、删除或移码突变，致使目的基因的功能丧失，进而可以对其功能进行研究。 促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）信号途径，包括MAPKKK、MAPKK和MAPK三级蛋白激酶，三者通过磷酸化逐级传递并放大刺激信号，参与调控细胞生长、发育、分化、凋亡等多种生理过程。而对MAPK基因的研究主要集中在MPK3、MPK4和MPK6，对其他基因研究较少。本文以模式植物拟南芥为材料，通过CRISPR/Cas9基因编辑系统，敲除拟南芥促分裂原活化的蛋白激酶编码基因MPK11，通过对敲除的突变体进行功能研究，以阐明MAPK级联信号在生长发育中的作用。 关键词：基因编辑；MAPK级联信号；拟南芥；突变体 |
