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| 黑枣精油的提取及其功能性质研究 摘要 黑枣，属于柿树科柿属，在我国黄河流域产量十分丰富。黑枣不仅营养物质丰富，还具有降血压、降血脂、抗氧化等食疗功效。本论文选用河北涉县的黑枣为原料，研究了黑枣精油的提取工艺、化学成分、抗氧化性、抑菌活性以及细胞毒性，旨在为为完善黑枣精油加工工艺，促进黄河流域黑枣产业结构发展，为黑枣精油功效和安全性提供理论参考。 本研究以黑枣为原料，采用两种萃取方法（有机溶剂法和超临界CO2萃取法）提取黑枣精油，分别优化并比较得出最佳提取工艺；采用GC-MS对黑枣精油化学成分进行分析；采用三种方法（清除DPPH自由基法、清除羟基自由基法、对β-胡萝卜素亚油酸体系抑制法）对黑枣精油的抗氧化性进行测定；采用琼脂盘扩散法和最小抑菌浓度测定法对黑枣精油抑制微生物能力进行评价，采用细胞膜完整性实验探索抑菌机理；采用MTT染色法对黑枣精油的细胞毒性进行测定，评价了黑枣精油的安全性。 结果表明： 1、有机溶剂法提取黑枣精油，正交实验优化后的提取工艺为：萃取剂为石油醚，提取时间3h，提取温度为50℃，料液比1∶20，黑枣精油萃取率为5.20%；超临界CO2萃取法提取黑枣精油，响应面实验优化后的提取工艺为：萃取压力20MPa、萃取温度52.4℃、萃取时间2.12h，黑枣精油萃取率为5.91%。超临界萃取法的黑枣精油得率要略高于有机溶剂萃取法，说明超临界萃取法更有利于黑枣有效成分的富集。 2、对超临界CO2萃取法得到的黑枣精油成分进行研究，采用GC-MS分析得出：酸类26.22%、醛酮类10.83%、酯类6.99%、醇类20.89%、烷烃类5.08%、酰胺类10.78%、糖类2.58%。 3、采用三种方法测定黑枣精油的抗氧化性，黑枣精油对DPPH清除的IC50值为46.46±1.70µg，对羟自由基清除的IC50值为0.55±0.03mg/mL，对β-胡萝卜素亚油酸系统抑制的IC50值为0.96±0.01mg/mL。黑枣精油具有中等的抗氧化性，且黑枣精油在清除DPPH自由基的敏感度比其它两种方法更强。 4、黑枣的抑菌实验表明：大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，青霉菌和黑曲霉菌的抑菌圈直径分别为12，11，10,，13,，12mm；对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，青霉菌和黑曲霉菌的最小抑菌浓度分别为0.8、0.5、0.5、1.0、1.0mg/mL，黑枣精油具有对细菌和真菌的中等抗微生物作用。细胞膜完整性实验表明，黑枣精油抑菌机理可能是通过破坏细菌细胞膜系统，改变细胞膜通透性使内容物溢出来实现的。 5、细胞毒性实验表明，黑枣精油在浓度不超过100µg/mL，正常细胞是安全的。 关键字：黑枣精油；提取；抗氧化；抑菌；细胞毒性 |
