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SARA低表达对ActivinASmads环路活性的影响

更新时间:2019-06-13
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SARA低表达对ActivinASmads环路活性的影响

摘要】 目的 探讨下调Smad锚捉蛋白(Smad anchor for receptor activation, SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法 利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA),瞬时转染激活素A(Activin A,ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48 h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。ActA环路活化3小时后Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果 靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC-shRNA质粒的转染效率均超过70 %。转染48 h后,SARA基因转录及蛋白水平的表达显著降低。ActA环路活化3小时后,与NC-shRNA组比较SARA-shRNA组Smad3总蛋白及磷酸化蛋白下调44 %和57 %。结论 SARA基因低表达下调 ActA/Smads环路活性。
【主题词】  SARA;ActA/Smads;Smad3;shRNA