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| 缺氧条件下Netrin-1对肝癌细胞迁移侵袭和凋亡的影响
摘要：【目的】研究缺氧条件下神经轴突导向因子Netrin-1表达的变化以及其对肝癌细胞HepG2迁移及凋亡的影响。【方法】构建O2浓度为1%，N2 浓度为94%、CO2浓度为5%的缺氧环境培养肝癌HepG2细胞，western-blot检测缺氧条件下肝癌细胞中Netrin-1表达的变化。构建Netrin-1 mRNA的干扰质粒shRNA-Netrin-1及阴性对照质粒pGensil-1，将其稳定转染入HepG2细胞中，应用Transwell法及流式细胞检测法分别观察在正常及缺氧环境下，HepG2细胞转染shRNA-Netrin-1质粒前后，其细胞迁移侵袭力及细胞凋亡率的变化。【结果】HepG2细胞缺氧培养24h后，其Netrin-1蛋白表达水平明显升高，差异有统计学意义（p＜0.05）。质粒shRNA-Netrin-1稳定转染入HepG2细胞后，Netrin-1蛋白的表达量明显受到抑制（p＜0.05）。细胞迁移侵袭实验结果显示，缺氧明显促进HepG2细胞的迁移能力（p＜0.05）。转染shRNA-Netrin-1质粒后，对缺氧环境促进HepG2细胞迁移能力有明显抑制作用，透膜细胞数（216±20）个相较于对照组（382±21）个明显降低，差异有统计学意义（p＜0.05）。流式细胞学检测结果显示，缺氧抑制HepG2细胞发生凋亡，转染shRNA-Netrin-1质粒后，shRNA-Netrin-1-HepG2细胞的凋亡率明显升高，差异有统计学意义（p＜0.05）。【结论】缺氧可以促进肝癌细胞中Netrin-1的表达水平升高，缺氧促进肝癌细胞HepG2的迁移、抑制其凋亡，这可能与Netrin-1的表达升高有关。
【关键词】缺氧，神经轴突因子，肝癌细胞, 迁移，凋亡
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