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德尔卑沙门氏菌LAMP检测体系的研究与应用

更新时间:2019-01-12
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德尔卑沙门氏菌LAMP检测体系的研究与应用

摘要:沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,同时也是一种比较重要的人畜共患病原菌。现针对德尔卑沙门氏菌的特异性基因,设计三套LAMP引物,并对反应时间、加酶量等进行优化。确立了加酶量为0.7μL 的25 μL LAMP反应体系。反应条件62 ℃,45 min扩增,80 ℃,10 min灭活,4 ℃保存。实验证明了此LAMP体系的特异性较强,能够准确、快速的对的德尔卑沙门氏菌进行检测。通过实验确定该体系的灵敏度为1.27×104 CFU/mL。在猪肉增菌液细菌浓度为2.12×103 CFU/mL干扰下该体系检出限为1.12×103CFU/mL,在鸡肉增菌液细菌浓度为1.24×103 CFU/mL干扰下该体系检出限为2.93×103 CFU/mL,在牛肉增菌液细菌浓度为1.27×103 CFU/mL干扰下该体系检出限为6.58×103,在鲜牛奶增菌液细菌浓度为1.48×103 CFU/mL干扰下该体系检出限为6.58×103 CFU/mL。
关键词:德尔卑沙门氏菌;LAMP体系;抗干扰;快速检测;