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| 风味中性蛋白酶酶解物促进嗜热链球菌增殖效果的酶解工艺优化 摘要： 嗜热链球菌是一种对人体有益的益生菌，能改善肠道内的微生物环境，抑制腐败菌，提高消化率，现多应用于发酵乳制品。但是由于嗜热链球菌的蛋白酶活性较弱，甚至缺乏必要的蛋白酶，因此最适合它们生长繁殖的氮源为蛋白质水解产物。草鱼皮具有高蛋白、低脂、低灰分的特点，是酶解制备胶原蛋白肽安全、优质、稳定的原料。 本试验以草鱼皮为原料，通过利用风味中性蛋白酶酶解得到酶解物作为嗜热链球菌的氮源，对其进行增殖培养。首先对酶解时间、料水比、加酶量三个因素进行单因素试验，再通过响应面法分析得到最佳的酶解条件，确定最佳的草鱼皮酶解工艺。结果表明：风味中性蛋白酶酶解草鱼皮的最佳条件为酶解时间为4.1 h，料水比为1:10，加酶量为3.1 %，此条件下得到的酶解物对嗜热链球菌的增值效果最佳。另外，根据分子量大小将最佳条件下得到的蛋白肽分为4段:＞10000 Da；5000-10000 Da；3000-5000 Da；＜3000 Da，研究不同分子量的肽段对嗜热链球菌增殖作用。结果表明，分子量＜3000 Da的肽段相比其他分子量的肽段更适合促进嗜热链球菌生长。 关键词：草鱼皮；风味中性蛋白酶；嗜热链球菌；多肽；响应面分析 目 录 1 绪论 3 1.1 草鱼简介 4 1.2 益生菌 4 1.2.1 益生菌的定义 4 1.2.2 益生菌的分类 4 1.2.3 益生菌的保健作用 4 1.2.4 益生菌的应用 5 1.2.5 嗜热链球菌的概况 5 1.2.6 嗜热链球菌的培养特性 5 1.3 胶原蛋白 6 1.3.1 胶原蛋白的概况 6 1.3.2 胶原蛋白的应用 6 1.3.2.1 在食品领域的应用 6 1.3.2.2 在医学领域的应用 6 1.3.2.3 在工业领域的应用 7 1.3.3 水产胶原蛋白的提取方法 7 1.3.3.1 热水提取法 7 1.3.3.2 酸提取法 8 1.3.3.3 碱提取法 8 1.3.3.4 酶提取法 8 2 材料与方法 1 2.1 原料和试剂 1 2.2 主要的仪器与设备 1 2.3 草鱼皮预处理 10 2.4 草鱼皮基本成分分析 10 2.5 草鱼皮酶解物制备 10 2.6 草鱼皮酶解的单因素试验 10 2.7 响应面试验 10 2.8 不同分子量草鱼皮酶解物的制备 11 2.9 鱼皮酶解产物促进嗜热链球菌生长活性的测定 1 2.9.1 嗜热链球菌增殖培养基的配制 11 2.9.2 嗜热链球菌菌种活化 11 2.9.3 嗜热链球菌增殖培养 12 2.9.4 嗜热链球菌培养液OD值的测定 12 2.10 实验数据处理及分析 12 3 结果与分析 12 3.1 草鱼皮的基本成分分析 12 3.2 酶解时间对嗜热链球菌增殖效果研究 13 3.3 料水比对嗜热链球菌增殖效果研究 13 3.4 加酶量对嗜热链球菌增殖效果研究 14 3.5 促进嗜热链球菌增殖效果的酶解工艺优化 14 3.5.1 响应面分析模型建立及其显著性 14 3.5.2 各因素之间交互作用 15 3.5.3 验证试验 18 3.5.4 不同分子量草鱼皮酶解物对嗜热链球菌增殖效果 18 3.5.5 GFSPH Ⅳ添加量对嗜热链球菌增殖效果 19 4 讨论 20 参考文献 21 谢辞 23 |
