| 以下仅列出文章摘要、提纲简介，如需获取全文阅读权限，或原创定制、长期合作，请随时联系。 微信QQ:312050216 |
 |
 |
| 超声分子探针对视网膜母细胞瘤皮下移植瘤的诊断和治疗的研究 摘要 目的 构建叶酸修饰的靶向阳离子的液态氟碳 (PFP)及吲哚菁绿 (ICG) 脂质纳米粒 (FA/CN/PFP/ICG, FCNPI)，检测其基本性质，相变特性，基因携载能力，细胞毒性及体内外靶向性等。 方法 本部分研究分为两节进行。第一节采用双乳化法制备脂质纳米粒，通过在成膜材料中使用叶酸修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇 (DSPE-PEG2000-Folate)，及加入DC-胆固醇 (DC-cholesterol)使纳米粒表面带有叶酸并带正电荷，从而构建靶向阳离子纳米粒FCNPI，对其形态结构，粒径，电位，ICG包封率等基本性质进行检测；体外使用808nm 激光仪激发，观察FCNPI发生相变的情况；并检测其携载质粒的能力，细胞毒性和稳定性。第二节是通过细胞实验和动物实验验证FCNPI的靶向性能。上述实验均同时制备非靶向中性纳米粒 (NN/PFP/ICG，NNPI)和非靶向阳离子脂质纳米粒 (CN/PFP/ICG，CNPI) 与之进行比较。 结果 本法制备的FCNPI脂质纳米粒呈绿色乳液，光镜及扫描电镜观察到形态呈球形，分散度较好，大小较均匀。激光共聚焦显微镜下经DiI染色后显红色荧光，连接经FITC标记的二抗后显绿色荧光，流式细胞学检测显示其叶酸的连接率高达98.82%。FCNPI粒径为 (328.4±5.5)nm，表面电位为 (35.3±1.9) mV。紫外分光光度计的方法测得FCNPI内ICG的包封率为92.1±1.3%。当采用激光辐照 (808nm，1W/cm2，2min) 后，可见FCNPI纳米粒发生气液相变产生了微泡。基因携载实验结果显示当加入40μg质粒时，靶向阳离子组 (FCNPI)，非靶向阳离子组 (CNPI) 和非靶向中性组 (NNPI) 携载TK-GFP的能力分别是22.4±0.1μg，22.7±0.1μg和16.76±1.75μg (per 5×108 nanoparticles)，FCNPI和CNPI的基因携载量无统计学差异 (P＞0.05)。细胞毒性实验表明NNPI、CNPI 、FCNPI携载质粒前后细胞活性均在85%以上，且在48h内稳定性良好。激光共聚焦显微镜观察，靶向阳离子组 (FCNPI) 可见到大量红色荧光纳米粒粘附于绿色荧光的细胞，其次是非靶向阳离子组 (CNPI)，而非靶向中性组 (NNPI) 和拮抗组均未见到明显的纳米粒与细胞结合的趋势。活体荧光检测显示靶向阳离子组 (FCNPI) 瘤块区域显示最多的荧光，在注射2小时后达到高峰，24小时逐渐消散，非靶向阳离子组 (CNPI) 仅少许红色荧光，非靶向中性组 (NNPI) 在观察时间内均未见到红色荧光。24小时后取出瘤块再检测荧光，靶向阳离子组 (FCNPI) 荧光最强，其次是非靶向阳离子组 (CNPI)，非靶向中性组 (NNPI) 最弱。 结论 成功制备出形态较规则，分散性较好，大小较均匀，性质较稳定的，生物安全性好的靶向阳离子相变型脂质纳米粒FCNPI。该造影剂具有良好的相变能力，靶向能力，为下一步实验奠定了基础。 关键词：叶酸靶向，阳离子脂质纳米粒，光致相变 ，基因携载 目 录 符号说明 1 中文摘要 2 英文摘要 3 论文正文：载基因的靶向阳离子光声/超声分子探针对视网膜母细胞瘤皮下移植瘤的诊断和治疗的研究 4 前 言 5 第一部分 靶向阳离子纳米分子探针的制备及性能检测 7 第一节 靶向阳离子纳米分子探针的制备及理化性质检测 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 第二节 靶向阳离子纳米分子探针的靶向性检测 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 第二部分 靶向阳离子纳米分子探针体内外光声/超声显像的实验研究 7 第一节 靶向阳离子纳米分子探针体外双模态显像的实验研究 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 第二节 靶向阳离子纳米分子探针体内双模态显像的实验研究 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 第三部分 激光辐照靶向载基因的阳离子纳米分子探针，体内外基因转染治疗RB的实验研究 7 第一节 激光辐照靶向载基因的阳离子纳米分子探针，体外基因转染治疗RB的实验研究 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 第二节 激光辐照靶向载基因的阳离子纳米分子探针，体内基因转染治疗RB的实验研究 10 1 材料与方法 11 2 结果 11 3 讨论 12 参考文献 13 附图 14 文献综述 60 致 谢 89 |
